Prinsipper for flowcytometri

2014/12/19

Flow kombinerer cytometry cellebiologi med studiet av lysbølger . Når en lysstråle som reflekteres fra en partikkel, sprer lyset i to retninger. Vinklene fra spredt lys måles , og beregningene skape et bilde av objekter mellom 0.5um til 40um i diameter . Strømningscytometri Metrikkene blir benyttet for å måle flere egenskaper av biologiske celler , inkludert størrelse, kornethet , celle -reseptorer , og til og med biologiske aktiviteter, slik som DNA -og RNA- replikasjon og -syntese. Process

Flowcytometri teknikker starte med å ta en biopsi av celler og passerer dem en etter en gjennom en stråle av lys i en cytometer . Ettersom cellene passerer gjennom strålen, blir lyset blir spredt og målinger av de ildfaste vinkler tatt . Den er utført i forbindelse med et fluorescerende mikroskop , som brukes til å evaluere komponenter i en celle gjennom lette utslipp av fluorescerende fargestoffer .
Strømningskammeret

formål strømningskammereter å fungere som en trakt for å sikre at celler blir levert til lysstrålen i en enkelt fil linje. Trakten fylles med en kappe fluid , og det er skjøvet inn i trakten med de suspenderte celler. Trakten bredde er typisk 10 mikrometer , og væsken blir presset inn i en samlelinsesom brukes til å spre lyset .
Light Source

Selv om flertallet av laboratorier bruker en laser , andre lyskilder inkluderer en bue lampe eller LED . En bue -lampe er ikke i stand til å detektere fluorescens svakere , men det kan brukes sammen med teknologi som benytter sterke fluorescerende emittere , slik som DNA-analyse. Primært er lyskilden en argon laser som avgir blått lys ved 488 nanometer .
Immunologi

Flowcytometri brukes til å måle en rekke forhold i immunologi og infeksjon . Flowcytometri brukes i diagnostikk av HIV for både arvelige og ervervede former. Det er også brukt til å måle nivåer av hvite blodcelleformeringi tilfeller av lymfom og karsinomer. I tillegg , immunologi bruker flowcytometri for å måle resultatene av benmargstransplanterte pasienter .
DNA analyse

Flowcytometri brukes til å måle mengden av DNA i kjernen av cellen. Ved å måle DNA, kan den spesifikke fasen av cellesyklusenkan identifiseres. Flowcytometri kan også oppdage unormalt antall kromosomer å identifisere genetiske sykdommer . DNA-analyse med flowcytometri er også brukt til å oppdage Barretts øsofagus .